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11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油 / 浸鏡油技術(shù)解析

更新時(shí)間:2025-08-17      點(diǎn)擊次數(shù):425
在光學(xué)顯微鏡高分辨率成像領(lǐng)域,浸鏡油的應(yīng)用是實(shí)現(xiàn)微米乃至亞微米級(jí)樣本精細(xì)觀察的重要技術(shù)環(huán)節(jié)。11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油憑借其精確調(diào)控的光學(xué)參數(shù)、穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)以及適配多種物鏡的特性,為科研工作者在細(xì)胞生物學(xué)、材料科學(xué)、病理學(xué)等研究中提供了可靠的成像質(zhì)量保障。
一、光學(xué)原理與核心作用機(jī)制
(一)消除光線(xiàn)折射損耗
11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油的核心功能基于光的折射原理。在常規(guī)空氣介質(zhì)中,光線(xiàn)從載玻片進(jìn)入物鏡時(shí),由于空氣(折射率 n≈1.00)與玻璃(載玻片和物鏡玻璃 n≈1.52)之間存在較大折射率差,會(huì)發(fā)生明顯的折射現(xiàn)象,導(dǎo)致部分光線(xiàn)偏離物鏡孔徑角范圍,無(wú)法進(jìn)入物鏡參與成像,從而降低成像分辨率和亮度 。徠卡浸鏡油的折射率經(jīng)精準(zhǔn)調(diào)配至與玻璃相近(n≈1.515 - 1.52),將其填充于載玻片與物鏡之間后,光線(xiàn)能夠以近似直線(xiàn)的路徑從樣本穿過(guò)載玻片、鏡油直達(dá)物鏡,有效減少光線(xiàn)折射損耗,使更多光線(xiàn)進(jìn)入物鏡,顯著提升成像亮度與對(duì)比度 。
(二)提升數(shù)值孔徑(NA)
數(shù)值孔徑是衡量物鏡聚光能力與分辨率的關(guān)鍵參數(shù)(公式:NA = n×sinθ,其中 n 為介質(zhì)折射率,θ 為物鏡孔徑角的一半)。11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油通過(guò)提高介質(zhì)折射率,直接提升物鏡的數(shù)值孔徑 。以油鏡為例,在空氣介質(zhì)中其數(shù)值孔徑通常為 0.95 左右,而使用徠卡浸鏡油后,數(shù)值孔徑可提升至 1.2 - 1.4 。更高的數(shù)值孔徑不僅能收集更多光線(xiàn),還可使物鏡分辨更小的樣本細(xì)節(jié)。根據(jù)瑞利判據(jù)(分辨率公式:d = λ / 2NA,其中 d 為可分辨的最小距離,λ 為照明光波長(zhǎng)),在固定光源波長(zhǎng)條件下,數(shù)值孔徑增大使物鏡能夠分辨的最小距離減小,從而實(shí)現(xiàn)更高分辨率的顯微成像,滿(mǎn)足科研中對(duì)細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)、納米材料等精細(xì)樣本的觀察需求。
二、化學(xué)成分與性能特性
(一)高純度基礎(chǔ)油與添加劑配方
11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油采用高純度的芳香族碳?xì)浠衔镒鳛榛A(chǔ)油,此類(lèi)碳?xì)浠衔锓肿咏Y(jié)構(gòu)穩(wěn)定,具有極低的揮發(fā)性,可有效避免鏡油在使用過(guò)程中因揮發(fā)導(dǎo)致的折射率變化,維持成像穩(wěn)定性 。同時(shí),鏡油中添加了特殊的防霧劑和抗氧化劑。防霧劑能夠防止鏡油在使用過(guò)程中因溫度變化或樣本水分影響產(chǎn)生霧氣,確保長(zhǎng)時(shí)間觀察過(guò)程中視野清晰;抗氧化劑則可抑制鏡油與空氣接觸發(fā)生氧化反應(yīng),延長(zhǎng)鏡油使用壽命,減少因氧化變質(zhì)對(duì)光學(xué)性能的影響 。
(二)物理化學(xué)穩(wěn)定性
該浸鏡油具備出色的物理化學(xué)穩(wěn)定性。在溫度適應(yīng)性方面,可在較寬的溫度范圍(4℃ - 40℃)內(nèi)保持穩(wěn)定的液態(tài)和光學(xué)性能,即使在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)(37℃)或低溫樣本觀察(如 4℃保存的組織切片)場(chǎng)景下,鏡油也不會(huì)出現(xiàn)凝固、變稠或折射率顯著改變的情況 。在化學(xué)兼容性上,與常見(jiàn)的載玻片清潔劑(如乙醇、異丙醇)、封片劑以及樣本染色劑等化學(xué)試劑均無(wú)不良反應(yīng),不會(huì)發(fā)生溶解、沉淀或化學(xué)反應(yīng),避免對(duì)樣本和物鏡造成污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性 。
三、產(chǎn)品性能優(yōu)勢(shì)
(一)精準(zhǔn)的光學(xué)均一性
11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油在生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的光學(xué)均一性檢測(cè)。每一批次產(chǎn)品的折射率波動(dòng)范圍控制在極小區(qū)間(±0.0005),確保不同區(qū)域、不同時(shí)間使用的鏡油對(duì)光線(xiàn)的折射作用一致 。這種高精度的光學(xué)均一性在進(jìn)行大視野拼接成像或長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)觀察實(shí)驗(yàn)時(shí)尤為重要,可避免因鏡油光學(xué)性能差異導(dǎo)致的圖像變形、亮度不均等問(wèn)題,保證獲得穩(wěn)定、高質(zhì)量的顯微圖像數(shù)據(jù)。
(二)低熒光背景
對(duì)于熒光顯微觀察,鏡油自身的熒光特性直接影響檢測(cè)靈敏度。11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油通過(guò)特殊的提純工藝和配方優(yōu)化,將自身熒光背景降低水平。在常見(jiàn)的熒光激發(fā)波長(zhǎng)范圍(如 488nm、561nm、640nm)下,鏡油產(chǎn)生的自發(fā)熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)低于樣本熒光信號(hào),幾乎不干擾熒光標(biāo)記樣本的觀察與定量分析 。在免疫熒光染色、熒光蛋白表達(dá)檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)中,低熒光背景有助于科研人員更清晰地分辨目標(biāo)熒光信號(hào),準(zhǔn)確獲取樣本的熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)。
(三)易清潔性與物鏡保護(hù)
使用后,11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油能夠被常規(guī)的有機(jī)溶劑(如二甲苯、無(wú)水乙醇)快速溶解并清除。其特殊的分子結(jié)構(gòu)使其在物鏡表面不易殘留,只需使用干凈的擦鏡紙蘸取適量溶劑輕輕擦拭,即可清除鏡油,避免對(duì)物鏡造成污染和損傷 。同時(shí),鏡油在使用過(guò)程中不會(huì)腐蝕物鏡鍍膜,對(duì)各類(lèi)物鏡(如復(fù)消色差物鏡、平場(chǎng)物鏡等)的光學(xué)涂層具有良好的兼容性,可有效延長(zhǎng)物鏡使用壽命,降低科研成本 。
四、實(shí)驗(yàn)應(yīng)用場(chǎng)景與操作規(guī)范
(一)生物醫(yī)學(xué)研究應(yīng)用
在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,使用 11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油配合高倍油鏡,可清晰觀察細(xì)胞內(nèi)的線(xiàn)粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu) 。例如,在研究細(xì)胞自噬過(guò)程時(shí),能夠通過(guò)高分辨率成像觀察自噬小體的形態(tài)、數(shù)量及分布變化。在病理學(xué)領(lǐng)域,對(duì)組織切片進(jìn)行 HE 染色或免疫組化染色后,借助徠卡浸鏡油可更細(xì)致地分辨細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)以及病變特征,為疾病診斷和病理機(jī)制研究提供高質(zhì)量圖像數(shù)據(jù) 。
(二)材料科學(xué)觀察應(yīng)用
在材料科學(xué)研究中,11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油適用于觀察納米材料、半導(dǎo)體器件等樣本的微觀結(jié)構(gòu)。對(duì)于納米顆粒的尺寸測(cè)量、表面形貌分析,以及半導(dǎo)體芯片中電路結(jié)構(gòu)的檢測(cè),高分辨率的光學(xué)成像可提供重要的表征數(shù)據(jù) 。例如,在研究二維材料(如石墨烯)的層數(shù)和邊緣結(jié)構(gòu)時(shí),浸鏡油輔助下的顯微鏡成像能夠清晰呈現(xiàn)材料的原子級(jí)臺(tái)階和缺陷,為材料性能研究和制備工藝優(yōu)化提供直觀依據(jù)。
(三)標(biāo)準(zhǔn)操作流程
  1. 使用前準(zhǔn)備:在使用 11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油前,需確保載玻片和蓋玻片表面潔凈無(wú)污漬,避免雜質(zhì)影響成像質(zhì)量 。同時(shí),將顯微鏡物鏡切換至高倍油鏡(通常為 100×),并調(diào)節(jié)載物臺(tái)至合適高度,使物鏡接近但不接觸樣本。

  1. 添加鏡油:使用移液槍或滴管吸取適量鏡油,滴加 1 - 2 滴于蓋玻片中央樣本區(qū)域上方,緩慢旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,使油鏡鏡頭浸入鏡油中,確保鏡油在物鏡與蓋玻片之間形成均勻的接觸層 。

  1. 觀察與調(diào)整:通過(guò)微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行對(duì)焦,觀察樣本成像效果。若出現(xiàn)亮度不均或模糊現(xiàn)象,可檢查鏡油層是否均勻,必要時(shí)補(bǔ)充鏡油或調(diào)整物鏡位置 。

  1. 使用后清潔:觀察結(jié)束后,立即使用干凈的擦鏡紙蘸取二甲苯或無(wú)水乙醇,輕輕擦拭物鏡表面殘留的鏡油,直至物鏡清潔干凈 。清潔后,將物鏡轉(zhuǎn)離載玻片,妥善保存顯微鏡和剩余鏡油。

(四)注意事項(xiàng)
  1. 避免交叉污染:不同批次或不同品牌的鏡油可能存在光學(xué)性能差異,嚴(yán)禁混合使用,防止影響成像效果 。同時(shí),使用過(guò)程中需避免鏡油污染樣本,建議采用專(zhuān)用的滴管或移液槍添加鏡油,且每滴加一次更換新的槍頭。

  1. 儲(chǔ)存條件:11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油應(yīng)儲(chǔ)存于陰涼、干燥、避光的環(huán)境中,避免高溫和陽(yáng)光直射,防止鏡油氧化變質(zhì)或揮發(fā) 。儲(chǔ)存溫度建議控制在 10℃ - 25℃,開(kāi)封后的鏡油需密封保存,盡快使用完畢。

  1. 安全防護(hù):鏡油中含有的有機(jī)溶劑具有一定毒性和揮發(fā)性,操作時(shí)需在通風(fēng)良好的環(huán)境中進(jìn)行,佩戴手套和口罩,避免皮膚接觸和吸入揮發(fā)氣體 。使用后的擦鏡紙和廢棄鏡油需按照實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)廢棄物處理規(guī)范進(jìn)行處置。

11513860--Leica 徠卡顯微鏡鏡油以其科學(xué)的光學(xué)設(shè)計(jì)、穩(wěn)定的性能表現(xiàn)和完善的使用規(guī)范,成為光學(xué)顯微鏡高倍成像實(shí)驗(yàn)中輔助材料。科研人員通過(guò)正確掌握其原理和操作要點(diǎn),能夠充分發(fā)揮徠卡浸鏡油的性能優(yōu)勢(shì),獲取高質(zhì)量的顯微圖像數(shù)據(jù),推動(dòng)生命科學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域的研究進(jìn)展。



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